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Microscopie optique Microscopie en réflexion totale interne exaltée e-TIRFM

Microscopie en réflexion totale interne exaltée e-TIRFM

La membrane plasmique est la porte d’entrée ou de sortie de nombreux pathogènes (bactéries, virus). Ces processus ont une temporalité précise et sont régulés spatialement à l’échelle de quelques molécules. Ainsi, mesurer la dynamique de ces constituants à la membrane de cellules vivantes lors de l’assemblage ou la pénétration de pathogènes permet d’incrémenter la compréhension de ces mécanismes. A cet effet des microscopies multimodales (temps, espace), en configuration TIRF, ont été mises en œuvre (TIRF-Im-FCS, TIRF-spt-PALM). Cependant elles souffrent de leurs faibles sensibilités.

En collaboration avec l’IRIM, l’équipe RCMO et cherche à améliorer drastiquement cette sensibilité afin de pouvoir localiser et suivre avec une haute précision spatiale (super-résolution) et temporelle (corrélation temporelle) ces molécules. Pour cela, des empilements multi-diélectriques résonants sont conçus et déposés sur un classique support de verre de microscope adaptables aux systèmes commerciaux. L’exaltation du champ local soutenue par l’empilement permet alors d’agir sur le champ excitateur induisant une forte augmentation de la sensibilité sur toute la surface cellulaire. Un brevet a été déposé.

Enfin, dans le cadre de l’ANR NIS, nous poussons ce concept plus loin vers une amélioration de la sensibilité et de la résolution spatiale en structurant ces empilements multi-diélectriques résonants en collaboration avec FEMTO-ST et l’équipe ATHENA de l’Institut.

Etude numérique de la distribution du champ dans un empilement résonant planaire et structuré

Collaborateurs : IRIM Montpellier, FEMTO-ST

Financeurs : CNRS 80PRIME CcP et ANR NIS

Contacts : Guillaume Demesy (ATHENA) et Julien Lumeau/Aude Lereu (RCMO)

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